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结构生物学
  • 1. 蛋白不表达、表达量低的原因是什么?
    可能与蛋白的稳定性有关系,稳定性低的蛋白易降解,导致得到的蛋白量偏低;也可能与选择的表达系统有关,原核表达系统可能会导致某些蛋白无法正确折叠,因而得到的蛋白量偏低。
  • 2. 表达得到包涵体蛋白怎么办?
    出现包涵体一般可能由于蛋白表达速度过快或蛋白折叠不正确,可以尝试优化蛋白表达条件,如降低诱导温度、诱导剂浓度、缩短诱导时间,使蛋白表达速度减缓。也可以尝试对包涵体蛋白进行纯化,将其变成有活性的蛋白。
  • 3. 蛋白不结晶的原因是什么?
    出现蛋白不结晶的原因有很多。蛋白自身可能存在纯度不够高、均一性不好、不稳定、蛋白浓度低、没有达到饱和浓度等原因。也可能受到一些外部条件的影响,如温度不适合(一般常温条件下即可进行蛋白结晶,但也有一些蛋白需要在低温条件下结晶)。
  • 4. 如果自己提供蛋白,需要提供多少量做一次结构解析?
    通常情况下需要提供10mg蛋白进行筛选。
  • 5. 三种结构解析技术(MicroED,冷冻电镜,X射线衍射)该如何选择?
    根据您的样品具体情况以及您的项目具体需求,我们会在详细了解之后为您提供最优的选择。
    通常情况下,如果您的样品可以结晶,且结晶过程顺利,我们推荐您使用常规的X射线衍射进行结构解析;如您的样品只能形成微纳晶体/粉晶,则推荐使用MicroED技术,减少在结晶过程中所消耗的精力、时间和成本,快速得到结果;若您的样品无法结晶,或您的项目需求中不能运用结晶手段,推荐您使用冷冻电镜的方式进行结构解析。
药物固态
  • 1. XRPD图谱多峰或小锋差异的原因是什么?
    XRPD多峰问题是晶型研究中出现比较多的问题,经常会在不同批次的药品中,发现有多峰、小峰差异。通常情况下,样品的晶型中含有少量的杂质晶型时,可能会出现一两个小峰的差异。出现这种情况,可以通过单晶培养来得到化合物的晶体结构,再模拟出它的XRPD图谱,从而确认样品的晶型纯度。另一种原因可能是晶习导致的,同一种晶型,可能会呈现出不同的晶体形貌。不同的晶体形貌由于择优取向的原因,XRPD衍射峰的相对强度会有明细差异。
  • 2. 化合物转晶的原因是什么?
    化合物从某种晶型状态转变为另一种晶型状态被称为转晶,与药物固体形态的理化性质,机械性质有关系。这些性质会影响药物的溶解度,溶出度,稳定性等,转晶会导致药物的性质发生改变,因此对药物固体状态转晶现象的研究在药物发展过程中也是非常重要的。从药物原料到固体制剂成品,中间经历多步加工过程(精制、粉碎、制粒、干燥、压片等),这些工艺过程都可能使药物晶型发生改变。
  • 3. 如果自己提供化合物,需要提供多少量做一次晶型筛选/盐型筛选/单晶培养?
    通常情况下晶型筛选/盐型筛选/单晶培养需要提供至少约5g/5g/1g化合物进行筛选。
  • 4. 对化合物进行晶型筛选还是盐型筛选?
    根据您的样品具体情况以及您的项目具体需求,我们会在详细了解之后为您提供最优的选择。
    通常情况下,如果您的样品化合物有可以成盐的官能团,可以同时对样品进行晶型筛选和盐型筛选,我们会根据初步筛选得到的晶型和盐型,再结合您的项目需求,来选择优势晶型/盐型进一步研究。
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