结构决定功能。蛋白质需要折叠成特定的空间结构才具有相应的生理活性和生物学功能。解析结构对于了解蛋白质的功能执行、生物大分子间的相互作用,以及药物发现等研究具有重要意义。
结构生物学是青云瑞晶的核心业务,我们拥有专业的团队和丰富的结构解析经验,以良好的服务态度为您的科研及药物研发工作提供定制化的结构解析方案。
青云瑞晶拥有在X射线晶体学领域杰出的专家,为您破解晶体学领域各种疑难问题。除此之外,针对难以结晶的样本,我们为您提供在结构解析领域最新、最成熟的MicroED技术。青云瑞晶自主开发了国际领先的MicroED结构解析平台,携手来自于瑞典斯德哥尔摩大学MicroED创始团队与北京大学的专家和技术骨干,为您解决晶体学领域的棘手问题。
X射线衍射
X射线衍射是测定晶体结构的主要方法,根据捕获到的衍射方向和衍射强度信号数据,即可计算出晶体的结构信息。
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技术特点
• 均一性好
• 适用于可结晶样品
• 所需晶体尺寸低至10μm
• 适用于解析靶点结构、蛋白小分子共晶、抗原表位鉴定
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实验流程
1. 由客户指定某种蛋白,进行蛋白表达、纯化;或由客户提供蛋白样本
2. 蛋白结晶,结晶方案优化
3. 结晶筛选,选择尺寸合适的单晶晶体
4. X射线同步辐射
5.
X射线衍射数据解析(包括de-novo 结构解析及分子置换结构解析)
服务内容和周期
步骤 |
实验内容 |
实验时间 |
备注 |
1
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基因合成和载体构建
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2周
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基因合成,质粒构建
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2
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蛋白表达和纯化
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2-6周
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纯度>90%,可结晶级别蛋白 |
原核表达系统:2-3周
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昆虫表达系统:5-6周
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哺乳动物表达系统:3-4周
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3
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结晶筛选和优化
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2-3周
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上千种筛选条件;高通量筛选设备
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4
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数据收集(同步辐射) |
2周
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充足的同步辐射机时,上海光源,Spring,Diamond
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5
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数据处理&结构解析
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1周
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通过分子置换、从头解析相位等方法解析晶体结构
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交付:符合PDB数据库接收标准的结构因子数据和结构原子坐标文件,衍射原始数据,结晶实验报告
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每2周进行一次进展汇报
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MicroED
MicroED是基于冷冻电镜而发展出的前沿技术。传统结构生物学中的X射线衍射手段有着对晶体结构的较高要求(一般需要>10μm就可
),而大晶体的培养通常难度高、耗时长、不确定性大,而且很多分子只能形成纳米级别的晶体。MicroED技术可以直接使用纳米级微晶收集数据、鉴定结构,从而极大缩短了结构研究中最耗时费力的湿实验的流程,节约实验成本,优化实验结果。
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技术特点
• 蛋白晶体尺寸只需在微纳米级别、不限分子量
• 适合处理膜蛋白微晶
• 周期极短,1~3天可出结果
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实验流程
1. 由客户指定某种蛋白,进行蛋白表达、纯化;或由客户提供蛋白样本
2. 蛋白结晶,结晶方案优化
3. 冷冻制样,冷冻聚焦离子束切割
4. 衍射数据解析
5.
MicroED数据解析(包括de-novo 蛋白分子模型搭建,分子置换相位解析)
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