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结构生物学服务

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关于“结构生物学服务”

PROTAC

背景

PROTAC (Proteolysis-Targeting Chimeras),蛋白水解靶向嵌合体,利用泛素-蛋白酶系统靶向特定蛋白使其在细胞内降解,成为近几年快速发展的新兴药物类型。

PROTAC分子由靶蛋白配体(POI ligand)、连接链(Linker)和E3连接酶配体(E3 ligand)三部分组成,能特异性结合靶蛋白的同时招募E3连接酶。

PROTAC中常用的E3连接酶有MDM2、cIAP1、VHL和CRBN。目前研究中,用到的主要是VHL和CRBN。

实验结果

CRBN-DDB1复合物

CRBN是E3泛素连接酶复合物CUL4-RBX1-DDB1中的一部分,常用配体为度胺类衍生物,该类衍生物分子量小、成药性好的特点使该蛋白复合物成为目前研究最多的PROTAC 连接酶。

我们用昆虫表达系统表达纯化出CRBN-DDB1复合物,可用于靶点 - PROTAC分子 - E3连接酶的结构研究。

图一 CRBN-DDB1复合物蛋白表达纯化结果

VBC复合物

VHL 基因是一种抑癌基因,其蛋白产物 VHL 可与 ElonginB、ElonginC、Cullin2 蛋白组成 VBC (VHL-ElonginB/C-CUL2) 复合物,该复合物属于 E3-泛素蛋白酶系统,介导人体内多种蛋白的降解。

我们建立了大肠杆菌系统表达纯化VBC(VHL- ElonginB-ElonginC)三元复合物的体系。

图二 VBC(VHL- ElonginB-ElonginC)三元复合物蛋白表达纯化结果
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