
MST检测技术是一种基于热泳动原理的生物分子相互作用分析方法。其基本原理是将其中一个互作分子(通常是蛋白或核酸)被标记上荧光染料或融合GFP标签,然后将标记的分子与配体分子按照特定的浓度梯度置于毛细管中。通过红外激光加热产生一个微观的温度梯度场,使得分子在这个梯度场中发生热泳动。在热泳动过程中,分子的水化层、大小、电荷等性质会发生变化,进而引起反应体系中荧光分布的变化。MST仪器通过监测这些荧光变化来定量检测生物分子间的相互作用。
二、MST技术揭秘蛋白与核酸亲和力的独特优势
高灵敏度:MST技术能够检测到微小的荧光变化,从而精确测量蛋白与核酸之间的亲和力,即使在低浓度下也能获得准确的数据。
实时监测:该技术能够实时监测蛋白与核酸的结合过程,为研究者提供了动态、连续的数据支持,有助于深入了解生物分子相互作用的机制。
无损检测:MST技术无需对样品进行复杂的预处理或标记,避免了可能的干扰和影响,确保了数据的真实性和可靠性。
广泛应用:MST技术不仅适用于蛋白与核酸的亲和力研究,还可用于蛋白-小分子互作(蛋白酶-抑制剂互作,细胞膜蛋白活性分析)、蛋白-蛋白互作、蛋白-核酸互作、蛋白-肽互作、肽-肽互作、核酸适配子-小分子互作,具有广泛的适用性。