蛋白表达纯化是生物医学研究中的关键核心技术之一，广泛应用于药物研发、疾病机制探索、蛋白质结构与功能解析等多个领域。从基础科研到临床应用，蛋白表达纯化的质量直接影响着研究的成败和成果的转化。而蛋白表达纯化整个实验工作流程长、细节多，标签如何选、怎么加、加了之后蛋白表达有何变化以及成功表达后的蛋白如何纯化，这个过程总是会出现各种问题，每每难倒实验室新人。

其中的蛋白纯化是指通过基因工程技术将编码蛋白的核酸序列导入到宿主细胞，再通过适当方法将其在体外纯化出来，从而获得高纯度、活性和产量的蛋白质。蛋白的分离纯化是一个复杂的过程，其原理都是利用其物理和化学性质的差异。物理性质包括分子的大小、形状、溶解度等；化学性质包括等电点、疏水性以及与其他分子的亲和性等。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化两个阶段。粗分离主要将目的蛋白和其他细胞成分（如RNA、DNA等）分开；精细纯化是把目的蛋白与其他大小及理化性质接近的蛋白区分开来。

总之，蛋白表达纯化是一项复杂且细节繁多的实验工作，通过深入了解蛋白的物理和化学性质，并合理运用粗分离和精细纯化等方法，可以有效应对这些挑战。对于实验室新人而言，熟悉这一过程的关键步骤和常见问题，有助于提高实验的成功率和效率，从而在蛋白研究领域取得更好的成果。